primer5是分子生物学常用的引物设计软件,准确率高,操作性强,下面小编就如何利用primer5进行引物设计分享自己的心得,本篇较简单,适合初学者。
操作方法01获取引物模板引物与模板一一对应,设计引物之前先要找到一段匹配的模板。以h9禽流感病毒ha基因为例,在ncbi上下载一个最新的病毒ha基因作为本经验所介绍的引物设计的模板。
02新建打开primer5(小编的版本为英文版),依次点击“file”——“new”——“dna sequence”,新建操作界面。
03输入模板基因复制基因模板后,使用键盘快捷键“ctrl v”将下载的引物模板粘贴到空白框内,然后选择“as is”,点击“ok”。
04search primer找到界面左上角“function”——“ primer”,在新跳出的界面上点击“search”,需要设置相应的条件,才能开始搜索。
05条件设置点击“search”后,又跳出一个界面,我们从上到下依次设置:“search for”选择“pcr primers”;“search type”选择“pairs”;“search ranges”要根据不同的情况而定,一般来说选择基因全长,如“1”——“1683”;“pcr product size”一般鉴定选择300-500,测序选择1200-1600,不能超过基因全长;“primer length”一般为20 (-)2。
06点击两次“ok”条件设置完毕后,点击“ok”,跳出新的界面后再点击“ok”,最后跳出软件为你选择的按照合成率从高到底的全部引物序列。
07引物选择将引物表与左侧表格结合起来进行引物的选择。从小编设计的引物表中看到,最高合成率为88,其对应的左侧表中均出现“dimer”和“cross dimer”,说明此引物不甚理想。最佳的情况为“hairpin”、“dimer”、“false priming”和“cross dimer”都不出现,也就是100合成率。
08重新设置条件如何引物不甚理想,那么就需要重新设置引物的各个条件,尤其是“search ranges”的选择,需要我们再次点击“search ”,跳出条件设置界面后重新设置。
09选择理想引物经过多次的不断更改和设置后,最终选出较为理想的一对引物,合成率最好在98以上,四种状况均不出现为好。
研究生复试需要做什么准备? 有些学校要求学生做ppt,有些学校不要求。做ppt请保证在页内,很多学校要求学生在~分钟做一个简短的自我介绍。可以总结研究生计划。如果没有做ppt,也请按此顺序介绍,老师想看的是科研成绩,然后判断是否是他想带的学生。现场发挥需要注意的事项。
ai如何快速便捷填色 (实时上色) 请往下看让你将左边的jpg勾成矢量图,国旗部分你是否会勾成右图的样子呢?然后改变图层叠放顺序达到和左图一样的视觉效果??不用这么麻烦了,“实时上色”分分钟帮你解决下面看图说话:end
如何用导数知识画函数y=sinx-1/sinx的图像 本,通过函数的定义域、值域、单调性、凸凹性等性质,介绍函数y=sinx-/sinx图像的画法步骤。end.函数的奇偶性函数y=sinx-/sinx为奇函数。end.函数的五点示意图函数y=sinx-/sinx上部分点解析表如下:end.函数示意图函数y=sinx-/sinx在直角坐标系下的示意图:end
如何制作小学毕业纪念册 孩子小学毕业时,是告别童年的重要时刻。制作一份纪念册,留给自己或孩子,将是有意义的一份礼物。b孩子获得各种奖项存起来,奖牌记得存原件和扫描件c孩子的作文,考试试卷等学校重要物品,都存好电子版二、纪念册的制作、利来w66国际首页要精心设计。、制作纪念册的目录。
读研如何查询导师信息选择导师与导师进行联系? 如果没有在该学校读研的学长或学姐,那么下面介绍如何通过学校宣传网站查询导师信息并如何与导师联系。打开一个导师信息界面,可看到导师的照片、职务、是否可指导硕士及博士研究生、w66.com的联系方式、研究方向、科研成果等信息。可以考虑以上信息选择导师进行联系。
如何进行光合色素的提取实验 光合色素的提取实验时高中生物中较少需要操作的实验,也是比较难以成功的实验。选取叶子此实验必须选择绿色且容易研磨的叶子,所以一般选择鲜嫩的菠菜叶,而且量不宜过多但也不能过少。分离色素将刚才画好的滤纸条放入到层析液中。end特别提示实验需要自己改进,有探索才有进步。
长度测量的特殊方法 长度测量中常常遇到一些不好直接测量的问题。这些就分别用到“累积”、“曲直互化”、“平移”、“公式法”等特殊办法和技巧。像这样先测出相关量,再利用公式求出被测量量的方法叫“公式法”再如测长方体体积也用此法。
医学相关的英语单词 可以点击上方的按钮,让系统朗读中英文对照的单词。medical医学的、medicalcertificate医疗证明、medicare医疗保险、prescription处方。hospital医院(楚楚baby是什么梗?楚楚baby这个梗就是出自抖音上面一位叫辣目洋子出演的搞笑视频,这个视频里面,辣目洋子饰演的是一个非常火的网络主播,名字叫“楚楚baby”。然而楚楚baby却因为太火了,所以遭到歹徒的绑架,绑匪看到本人不相信这个就是楚楚baby,之后把手机拿出来打开美颜和滤镜,结果发现,她就是所谓的“楚楚baby”这个梗也就是用来嘲讽那些见光死的网红,不管在直播面前多么的好看,看到本人之后竟然都不认识了。)、clinic诊所、outpatient门诊、menztreatment治疗、cure治愈。rash皮疹、spiky多刺的、allergy过敏、unwell不适。hurt伤害/损害、stomachache肚子疼、胃疼、headache头痛、broken骨折/损坏、fall摔倒。cold感冒、flu流感、burnt烫伤、cough咳嗽、asthma哮喘。
考试紧张要怎么办 考试在我们日常生活中是经常遇到的,往往对于上学的孩纸们来说更是,那么我们在考试紧张的时候要如何办呢?目前一年一度的高考就要来临了,那么很多学生都是感觉到紧张感来了,今天我们就一起来说说考试紧张如何破。
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